Ribonuclease Inhibitor说明书
【产品编号】
AI101
【产品规格】
50 units/μl
【储存条件】
-20℃，保存两年。
【产品说明】
Ribonuclease Inhibitor是经大肠杆菌表达、纯化的人胎盘的重组蛋白，特异性地抑制RNaseA、RNase B和RNase C。不能抑制RNase1，RNaseT1、S1核酸酶、RNaseH或曲霉菌来源的RNase。对DNA Polymerase、AMV RTase、M-MLV RTase以及SP6、T7和T3 RNA聚合酶无抑制作用。
【酶贮存缓冲液】
50% glycerol，50mM Tris-HCl(pH7.5)，0.1mM EDTA，10mM DTT and 100 mM NaCl
【活性定义】
抑制5ng RNaseA活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
【适用范围】
第一链cDNA合成、多核糖体的分离、体外翻译、体外无细胞系统转录、SP6或T7RNA聚合酶的体外转录。
【第一链cDNA合成】
1、加入
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Component |
Volume |
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Total RNA/mRNA |
50 ng-5 μg/ 5-500 ng |
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Anchored Oligo(dT)18(0.5μg/μl) |
1μl |
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or Random Primer(N9)(0.1 μg/μl) |
1µl |
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Or GSP |
2 pmol |
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10mM dNTPs |
1 μl |
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5×RT Buffer |
4μl |
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Ribonuclease Inhibitor |
0.5µl |
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EasyScript®/TransScript®RT |
1ul |
2、轻轻混匀
·如用Anchored Oligo(dT)18或基因特异引物(GSP)，42℃孵育30分钟。
·如用Random Primer，25℃孵育10分钟，42℃孵育30分钟。
3、85℃加热5秒钟失活EasyScript®/TransScript®RT。
【注意事项】
·抑制活性的pH值范围较广，在pH7.0-8.0时表现最大活性。
·起泡或强烈搅拌(Vortex等)会引起失活。