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Cas9 Nuclease (SpCas9)来源于S. pyogenes菌株，是依赖于sgRNA引导的 DNA内切核酸酶，切割双链DNA。
SpCas9 Nuclease说明书
【产品名称】SpCas9 Nuclease 【分子量】164.5KDa
【产品编号】EDE0008 【形式】液体
【产品简介】
Cas9 Nuclease (SpCas9)来源于S. pyogenes菌株，是依赖于sgRNA引导的 DNA内切核酸酶，切割双链DNA。在靶标DNA存在PAM(proto-spacer adjacent motif)的情况下，Cas9 Nuclease能在sgRNA引导下特异性地剪切靶标双链 DNA，使DNA双链断裂并生成平末端。PAM序列对于Cas9识别和剪切靶标DNA是必需的，其剪切位点位于目标序列(target sequence)内，离PAM区3个碱基。还可应用于体外靶标 DNA 的剪切、目的片段的克隆等实验。
【产品组分】
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组分 |
EDE0008-100 |
EDE0008-1000 |
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SpCas9 Nuclease（1 μM） |
1 μM*100 μL(100 pmol) |
1 μM*1 mL(1000 pmol) |
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Buffer（5×） |
500 μL*1管 |
500 μL*1管 |
【储存条件及有效期】
有效期1年，保存条件-20°C；如长期储存，建议置于-80°C。
建议根据使用次数进行分装，避免反复冻融。
【产品特点】
采用一步法纯化制备，最大程度保留酶活性，经过测试酶活性显著高于同类产品。
【质量保证】
样品纯度：～95% （SDS-PAGE鉴定）。
【测试反应体系】
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组分 |
体积/ μL |
终浓度 |
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5×Buffer |
4 |
1× |
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SpCas9 Nuclease（1 μM） |
5 |
250 nM |
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1000 nM sgRNA |
0.5 |
250 nM |
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1 μM DNA |
0.5 |
25 nM |
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DEPC H2O |
-20 μL |
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37°C反应 30 min，可通过非变性核酸电泳对实验结果进行检测。
【注意事项】
1. 为防止 RNase 污染，请保持实验区干净整洁，操作时需穿戴干净的手套、口罩，实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free。
2. SpCas9 酶对热敏感，容易失活，应全程冰上配置反应体系，并在使用后立即将酶置于-20℃保存。
